作者ararthur ()
看板Biotech
標題[方法] 直接vortex cell pellet?
時間Tue Mar 17 15:19:38 2015
在某個染色實驗protocol裡看到一個步驟有點陌生
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10. Add 2 mL of 1X assay buffer to each tube.
11. Mix each tube.
12. Centrifuge the stained cells at < 200 X g for 5 minutes at RT.
13. Carefully remove and discard supernatants.
14. Gently vortex the pellets to disrupt any cell-to-cell clumping.
^^^^^^^^^^^^^^^^^^
15. Resuspend the cells in 1 mL of 1X assay buffer.
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如果不是我理解錯誤，
它應該是叫我直接vortex cell pellet without buffer沒錯吧？
因為我做了4年多的細胞實驗，
好像沒有做過直接vortex cell pellet的經驗
這樣的步驟合理嗎？ 還是它純粹是step.14 &15寫顛倒？
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.121.122
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※ 編輯: ararthur (140.112.121.122), 03/17/2015 15:20:22
1F：→ fentanyl945: 關鍵字是那個 gently 03/17 22:06
2F：→ ararthur: 請問樓上是否做過直接vortex cell pellet的實驗呢 03/18 00:07
3F：推 lilyj: 我們每次算細胞染Trypan Blue前都vortex耶,除了一些很嬌貴 03/18 01:33
4F：→ lilyj: 的細胞處理方式要不一樣, 大部分都可vortex吧 03/18 01:34
5F：→ ararthur: 請問是在medium removed情況下vortex嗎? 我通常只pipett 03/18 12:02
6F：→ ararthur: -ing而已 03/18 12:02
7F：→ tz2733: 因為步驟13液體無法去除很乾淨 15加buffer前希望細胞散開 03/19 20:03
8F：→ Ice9: 手指頭多敲幾下就好了。 03/20 09:15