作者a14743535 (pig)
看板Biotech
標題[求救] 3T3-L1分化
時間Tue Jan 13 15:28:16 2015
小弟最近在養脂肪細胞
但是覺得養不太好
分化的時候總是會有幾個well的細胞有開始脫落的現象
想請問板上有沒有
有經驗的可以分享一些在誘導分化的時候的小撇步
可以盡量減少這個情況的發生
謝謝大家了
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1F：推 yuasa: Gelatin coating your plates 01/13 19:49
2F：→ zoe77101y: 分化的medium會使細胞比較不貼,建議種多一點看看！ 01/14 08:26
3F：推 ararthur: 代數問題 可以試著全部都不加antibiotics 我的經驗是能 01/15 14:17
4F：→ ararthur: 稍微幫助 但也應該要準備買新的細胞了 3T3L1是有限的 01/15 14:18
5F：→ a14743535: 代數大概在多少以內的比較適合呢？ 01/15 15:33
6F：推 ararthur: 這很難講 現在從ATCC或BCRC買到的都是unknown 但基本上 01/20 16:01
7F：→ ararthur: 他們手上會出貨的都還是有分化能力 就我經驗 BCRC去年買 01/20 16:02
8F：→ ararthur: 的 好像從PU+6開始 我用到PU+12左右就快撐不住了 如果有 01/20 16:03
9F：→ ararthur: 可仰賴的實驗室能分享年輕一點的細胞或許能要看看 01/20 16:03
10F：→ ararthur: subculture請用1xPBS wash兩次 0.5x trypsinize 1min 01/20 16:05
11F：→ ararthur: 70%前一定要subculture 並且不能太稀 頂多1:4-1:6 01/20 16:06
12F：→ ararthur: 吸differention medium時 不要吸太乾淨 也離細胞遠一點 01/20 16:07
13F：→ ararthur: 6-well plate是我目前的極限 以前都可以用12-well輕鬆做 01/20 16:08
14F：→ ararthur: 如果細胞邊緣一直容易脫落 enlarge scale是可行辦法 01/20 16:10
15F：→ ararthur: 我目前能想到的就是這樣了 在這個3T3-L1末法時代走過4年 01/20 16:10
16F：→ ararthur: 不得不想辦法存活啊 01/20 16:11