作者hsin37 (因禍得福???)
看板Biotech
標題[求救] Real-time PCR的PCR efficiency~
時間Thu Nov 20 19:37:29 2014
想請問大家，
做Relative quantification的real-time PCR前
都會先確認PCR efficiency嗎?
查的文獻說一定要統一PCR efficiency
做出來的數據才有意義....
可是我們老師認為沒有做的必要，
沒有人在做....問了隔壁研究室的前輩，
也說他們實驗室也沒有人在確認這個的，
請問大家的實驗室也不會確認嗎?
這樣做出來的DATA發表paper的話，會不會有問題呢?
謝謝回答^^
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1F：推 qiet: 很多人都沒有做, 但建議可以測試一下較安心 11/20 22:10
3F：→ skyken10: 一下這篇paper，你就會知道需不需要做了！ 11/21 01:01
4F：推 liuse: 你不做要怎麼算之後的data 都當成double per cycle? 11/21 08:50
5F：推 svc1213: 投稿時 ，曾經被問過 。 11/22 23:58
6F：→ WinnieDad: 的確不少researchers和publications就直接假設是2了… 11/23 14:08
7F：推 LeonPPK: 可以加做一個standard curve就可以確認了 12/01 00:16
8F：推 jabari: 你有幾個gene要測?大於4個的話直接改算相對表現量改變 12/03 19:17
9F：→ jabari: 反正你有放control 又有house keeping 多於4個基因還作eff 12/03 19:18
10F：→ jabari: 只會殺了自己尤其是(真)standard curve是算copy number的 12/03 19:18
11F：→ jabari: 打太快 是改用'進階'相對表現量改變 就是有個對照基本樣品 12/03 19:20
12F：推 gps0110: 借這篇問一下 如果用ddCt法做relative quantification的 12/04 01:57
13F：→ gps0110: 話 需要每盤都有housekeeping gene嗎？sample很多 一盤 12/04 01:57
14F：→ gps0110: 放不下 每盤都要housekeeping gene的話要做的量一下子多 12/04 01:57
15F：→ gps0110: 好多 12/04 01:57