作者chenmick ()
看板Biotech
標題[求救] seeding 96-well/ATPlite 高手
時間Thu Nov 6 11:07:53 2014
我要把細胞種在96-well plate,加藥後用ATPlite測細胞存活率
但是error bars都超大,在想是因為細胞不均勻還是ATPlite沒做好:
1.細胞調完濃度後倒到dish,用八爪吸200ul加到96-well
但細胞都會聚集在well的邊邊,well中間的細胞都比較少,
請問seed的時候有什麼要特別注意的嗎?
定點加or繞著圓圈加? 慢慢加or快快加? 加玩搖一搖or靜置10~15min?
2.在加完ATPlite的的試劑後都會產生很多泡泡,請問這些泡泡影響儀器偵測冷光嗎?
感恩~
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1F：→ blence: 看描述,種到96well沒有至少放置o/n讓cell貼附？ 11/06 11:13
2F：→ blence: 96well很好分的,沿壁面正常速度加入,不必搖就很均勻 11/06 11:17
3F：→ blence: 另外96well裝到200ul,離溢滿的高度應該不遠了 11/06 11:20
4F：→ chenmick: 有讓細胞貼o/n,隔天才加藥 sorry 11/06 15:45
5F：→ raiyu: 2泡泡會影響 11/07 08:14
6F：→ raiyu: 雖然我覺得你的誤差大是因為泡泡跟細胞是不是在well邊無關 11/07 08:19
7F：→ raiyu: 但可以 試改成loading 100ul 11/07 08:22
8F：→ moon0126: 濃度調100-150ul/well,吸過量在加到well 11/11 00:02