作者ncbi (低調，D掉。)
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標題Re: [求救] 請問關於α-MSH的問題
時間Mon Oct 27 15:05:59 2014
引用搜尋到2012年版友的疑問
目前有在用B16-F10做實驗 也是想要做原料是否具有美白效果的評估
目前已嘗試到：
seeding 1*10^5 cells/ml in 24-well (high glucose DMEM+10% FBS)-->
用100nM、500nM、1uM等劑量的α-MSH(stock溶於水)刺激3天-->
PBS wash後每well加100ul含10% DMSO的1N NaOH溶液@60度C 1小時破細胞-->
最後量405nm的吸光值
但不管有無加α-MSH，吸光值都很低阿!!(低於0.1)
肉眼看是有點顏色 但非常淡
不知道是否有先進能提供寶貴意見呢？
感謝orz
※ 引述《ben00691206 (Ben)》之銘言：
: α-MSH是能夠刺激黑色素細胞產生黑色素的hormone
: 而很多篇paper都只用100 nM就可以induce B16細胞的黑色素生成至少2倍以上
: 但我在實驗室用0.5μM treat B16細胞無法induce，甚至用到15μM一樣看不到明顯的黑
: 色素生成(24小時收)
: 想請問一下這是為什麼
: 是不是α-MSH壞掉還是細胞敏感度的問題?
: 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.34.191.172
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※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:21
※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:19:57
※ 編輯: ncbi (1.34.191.172), 10/27/2014 15:27:47
1F：推 ab90377: 我們做法細胞是1*10^7培養ㄧ天後再加a-MSH 10nM ，16小 01/02 00:01
2F：→ ab90377: 時後就收細胞， 你收細胞的做法可以改變ㄧ下，我們測到 01/02 00:01
3F：→ ab90377: 的OD至少都有0.5 01/02 00:01