作者d751549d (songla~)
看板Biotech
標題[求救] pyrosequencing dNTP濃度
時間Fri Jul 25 16:47:28 2014
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除
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最近實驗室開始做pyroscequencing的實驗
因為沒有要用到前PCR
只有單純做Pyro的部分
但因為實驗要求
需要調整dNTP的濃度
但上網查都只有做PCR需要的濃度而已
廠商那邊也不願意告訴我們配方
所以想請問有經驗的各位
在pyrosequencing時
dATPas / dNTP的濃度大約是多少呢?
感謝
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1F：推 gerpy:基本上自行調整dNTP只有可能造成Pyro失敗，因為pyro是一個連 07/26 14:38
2F：→ gerpy:續四個Enzyme的連續反應，只要dNTP濃度不對，四個Eznyme的反 07/26 14:39
3F：→ gerpy:應就可能反正不完全，造成DATA有問題，另外就算知道了dNTP濃 07/26 14:40
4F：→ gerpy:度，每個pyro使用的cartriadge都有不同的method來丟出dNTP跟 07/26 14:41
5F：→ gerpy:Enzymes(維持反應的精細度) 07/26 14:42
6F：→ mitosi:你是在問sequencing的時候cartridge A/T/C/G 所需要的用量? 08/07 23:17