作者Struggling (Struggling)
看板Biotech
標題[討論] 有關reagent配製的"倫理"
時間Thu Jul 17 21:21:27 2014
標題實在不知道怎麼下, 請各位大大見諒.
今天發現一件讓我很崩潰的事情...
今天去別家實驗室發現有人做E.coli cell lysis所用的 DNaseI, Lysozyme是直接用
藥杓"取一點"然後直接加入要做cell lysis的solution 中反應.
我聽了很震撼, 因為他們家不只一人這樣, 據說是向同一個學姊學的方法.
我覺得如果是剛進lab的freshman真的是別人怎麼教就會怎麼做, 我可以理解...
後來我回到lab忍不住跟同事聊起這件事, 同事跟我說"我也是這樣耶..."
我當下想變身成余天抱著頭說"我快崩潰了~我快崩潰了~!!!
後來我終於從土石堆中爬了出來, 我在想是不是我老古板了, 原來破E.coli已經演化到
可以這樣做我還不知道, 還在自以為是"崩潰"? DNaseI, Lysozyme好像是"相較"非常便
宜的東西,便宜到可以這樣用了? 是不是實驗可以做出來, protein可以純>90%出來就好?
我常常嘴砲說"實驗可以做出來就好", 現在我開始這句話是不是大有問題?
Anyway, 我想reagent配成stock, 依據實驗的需要來使用正確的濃度/量是不爭的事實.
但是我還是希望有人可以提出對這件事情更深層的見解.
謝謝
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1F：推 tsubasawolfy:然後等連鎖汙染後再推給歷史共業XD 07/17 21:53
2F：→ blence:不知道你覺得DNaseI, Lysozyme配合stock的儲存期可多久？ 07/17 23:42
3F：→ blence:應該不是探討要不要先配成stock,而是有沒有依照用量添加吧 07/17 23:53
4F：→ Struggling:Sigma lysozyme's storage and stability 07/18 09:31
5F：→ Struggling:The product, as supplied, should be stored at –20 07/18 09:31
6F：→ Struggling:C, it retains activity for at least 4 years. 07/18 09:33
7F：推 biingru:哈！我在美國整個系都用這招 哈哈 07/18 09:45
8F：→ nike77114:不是應該稀釋然後分裝用嗎@@? 07/18 15:30
9F：→ nike77114:原PO是指其他人都直接取母液? 07/18 15:30
10F：→ Ianthegood:原po應該是指直接取powder... 07/18 15:43
11F：→ Struggling:podwer 07/18 17:26
12F：→ shelix:照用量添加的話直接配在solution裡會比配stock準吧 07/18 23:08
13F：→ shelix:配stock是節省時間成本 07/18 23:10
14F：推 gps0110:我在英國也這樣 剛來很意外XD 07/19 01:54
15F：→ Ianthegood:如果用量很少鐵定不準阿 07/19 01:57
16F：→ Ianthegood:而且reproducibility 07/19 01:57
17F：→ blence:如果原po是用sigma lysozyme一個產品說明,那好像在誤導喔 07/19 15:24
18F：→ blence:那一句話,是來自powder的說明,跟你配成stock是不一樣的 07/19 15:25
19F：→ blence:甚至,你沒看For E.coli cell lysis,這段,清楚寫著freshly 07/19 15:26
20F：→ blence:prepared字眼,如果你不確定stock放多久,反倒是你的有問題 07/19 15:29
21F：→ blence:如果你的點是沒照定量隨便取的確不好,可是講powder就得斟酌 07/19 15:33
22F：推 hdikam:直接取powder+1 剛學的時候也很shock~~~ 07/21 00:46
23F：→ Struggling:如果敢在paper裡methods寫用podwer被accept我就沒話說 07/21 12:42
24F：→ blence:你知道fresh prepare的意思嗎？ 肯定不是配成stock的 07/21 13:16
25F：→ blence:我會寫秤好多少powder,直接加到lysis buffer裡面 07/21 13:17
26F：→ blence:另外還是請你確認一下,你的lysozyme配成的stock可以放多久 07/21 13:20
27F：→ blence:其實與其用PBS或水等配成stock放著去degrade,或用一次丟掉 07/21 13:33
28F：→ blence:跟秤好powder用lysis buffer去溶,不就是換個溶劑,有何奇怪? 07/21 13:35
29F：→ Struggling:了解, 謝謝樓上 07/21 16:55
30F：→ qumai:我也會每次從粉末開始配新的..paper就寫終濃度就好 07/24 15:04
31F：→ lail:藥勺是乾淨的，沒有沾到lysis buffer再碰到power應該就還好吧 07/29 23:08
32F：→ lail:。 07/29 23:08