作者Lowrider (我想我需要幸運女神...)
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標題[求救] DGGE 鑄膠有氣泡
時間Wed Jul 16 16:44:20 2014
請問各位有鑄大片膠 (SDS PAGE) 的先進
小弟跑的是 DGGE
鑄膠時也確認沒氣泡
預混液也有預先離心讓氣泡不見
但是一旦放進 buffer 裡面預跑
5~60度 泡一泡就發現會有大顆氣泡產生
還有遇過整個開花像蚯蚓狀的花紋
這樣的狀況是因為 漏膠?
(這次是鑄垂直膠
因為用水試的時候發現有漏一點 有另外用長尾夾幫助固定
後來就ok
不過真正鑄膠的時候還是有漏一點)
或者玻璃沒洗乾淨呢?
還是有其他問題
比方說....
acrylamide 等等的預混液過濾的不夠乾淨 顆粒太大 degas 不夠久?之類的
APS & temed 是沒有在過濾的吧 冏rz
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原po 是孤僻兼自我感覺良好的 胖子
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1F：推 as862437:窘! 我們LAB做都沒有degas這步驟，會不會是在跑電泳時 07/16 22:19
2F：→ as862437:膠片滑下拉扯的呢? 我們的玻璃也都感覺白白的洗不掉 07/16 22:19
3F：→ as862437:有洗乾淨但是也不算是完全透亮的玻璃，正常可以跑 07/16 22:20
4F：推 kakaman:做過2D大片膠,沒degas,頂多注膠時有敲擊桌面，使氣泡上浮 07/17 12:48
5F：→ Lowrider:我以前做2D 也不用 但是 DGGE 大概因為有加尿素 07/17 19:58
6F：→ Lowrider:怕溶解不完全 所以還多了過濾跟 degas... 07/17 19:59
7F：→ Lowrider:目前是要把預混液 degas後再試 07/17 19:59
8F：→ dehydrogenas:玻璃沒洗乾淨 APS不新鮮 07/22 14:45
9F：→ Lowrider:昨天晚上跑看起來還ok 早上來就大開花 快昏倒了 XD 07/25 11:10
10F：→ Lowrider:洗玻璃我都有洗到 嚕出聲音 然後用酒精擦阿~~orz 07/25 11:12
11F：→ Lowrider:莫非是 APS 太古老 @@? 2006買的 07/25 11:13