作者wolfling22 (夜狼兒)
看板Biotech
標題[求救] THP-1細胞不貼
時間Tue Jul 1 10:53:02 2014
大家好,目前我的實驗內容是培養THP-1這株細胞,然後分裝至6-well中,加PMA讓
它貼在well上再進行後續實驗。
可是這段時間以來不知道為什麼,細胞貼的狀況非常慘不忍睹,幾乎沒有貼。
我試著調整過,包括提高PMA濃度至100ng/ml(每個well有2ml)、多放一天(48hr→72hr)
等,但狀況都很不穩定,有時貼有時沒貼。
問過實驗室的學長姊,PMA應該沒有過期的問題,平時都-20保存也不會壞;操作時cell濃度
也和學姊指導時一樣,也有盡量mix well(左左右右前前後後晃了n次)。
有沒有細胞欺負新人,有學姊在旁邊鎮就很乖,學姊離開後就不聽話的八卦。Orz
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1F:→ KittyGod:先放上學姊的圖 07/01 11:28
2F:→ untilnow:先放上學姊的圖 07/01 11:40
3F:→ xxtomnyxx:在 incubator 放上學姐的照片,讓細胞覺得學姊在盯它! 07/01 12:44
4F:→ roy047:incubator CO2那些應該都正常吧? 07/01 14:39
5F:→ wolfling22:QB很正常,CO2濃度也都穩定,因為是公用的不會去調@@ 07/01 14:54
6F:→ duriamon:問題主要應該是在PMA,PMA很容易降解,一定要保存在DMSO中 07/01 18:24
7F:→ duriamon:而且PMA不能反覆冷凍解凍,最好分裝成一次用完的量 07/01 18:26
8F:→ duriamon:詳情請上網去看Sigma的DataSheet以及它提供的paper 07/01 18:27
9F:推 apple23418:這株不是懸浮細胞嗎? 07/04 14:59
10F:→ skyofsilver:回樓上,他有加PMA刺激喔~ 07/04 23:38
11F:→ alex53001:沒看到PMA之前跟APPLE有一樣疑問 07/07 19:53