作者kuochuwon (黑輪桑~ YO)
看板Biotech
標題[求救] [IHC]脫水步驟中的甲醇為何不會傷害抗原
時間Thu May 22 22:30:38 2014
各位前輩們好，我是新手上路的碩一新生
最近再做IHC(immunohistochemistry)相關的實驗
老師考我一個問題，IHC步驟中的脫水（dehydration）會不會
破壞(或是使變性)細胞中的蛋白質或某些抗原，我知道答案應該是不會
不然我們做IHC實驗就不會用methanol來脫水了
但我google了很久，都找不到相關資料(只有說可以放心使用methanol來脫水)
到底為什麼methanol不會害蛋白質等物質變性呢?
ps: 我們所操作的model是斑馬魚,目的是要標記體內的huC/D蛋白
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 163.25.118.181
※ 文章網址: http://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1400769040.A.3EA.html
1F：推 milkpa:從IHC的原理去找答案 05/22 23:01
2F：推 d200190:應該是會吧，只是antibody挑可以抓denatured protein的 05/23 16:59
4F：→ kuochuwon:感謝1F和2F連結，回去後仔細讀看看 05/23 17:42
5F：→ kuochuwon:找到答案了,但和所給的連結沒什麼關係... 重點是IHC步驟 05/27 22:43
6F：→ kuochuwon:中做的PFA fixation就有避免甲醇使蛋白變性的效果 05/27 22:43
7F：→ d200190:連結就有提PFA fixation可能造成變性啦...已經變性當然就 05/28 15:42
8F：→ d200190:不怕methanol了 05/28 15:43
9F：→ kuochuwon:沒想到你回了XD 06/17 15:59
10F：→ kuochuwon:有點不懂,PFA應該不會造成變性吧?連結失效了所以我沒辦 06/17 16:00
11F：→ kuochuwon:法再次看,你說PFA造成變性 ,那要binding的抗體不就無法 06/17 16:01
12F：→ kuochuwon:結合上去了? 06/17 16:01