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拍謝 這是小弟第一次發文 如果排版不好還請見諒 不知道版上有沒有人有對TALENs或者是CRISPR有所涉略? 最近我老闆要我去找相關PAPER 也看了幾篇有所理解 似乎是出錯率低又精準的技術 不知道各位版友怎麼看? --



※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.17.107
1F:→ soom:可否再說明一下你的想法,以便拋磚引玉,幫助討論 03/19 13:11
2F:→ newmankind:我也想找這方面的資訊,雖然TALEN有kit, 03/19 14:40
3F:→ newmankind:不過用的人好像不多 03/19 14:40
4F:→ newmankind:有用過的先進,可以分享一下心得嗎? 03/19 14:41
5F:→ newmankind:目前個人的理解是,雖然宣稱是knockout基因, 03/19 14:42
6F:→ newmankind:不過好像有需要特別的序列(結構?) 03/19 14:43
7F:→ blut0806:目前我是TALENs的paper看得比較多, CRISPR則 03/19 15:59
8F:→ blut0806:僅在一篇review讀過, 03/19 16:00
9F:→ newmankind:Addgene(聯奇)有出一套TALEN的KIT,不過成大沒人用過 03/19 16:06
10F:→ newmankind:也不知道效果好不好 03/19 16:06
11F:→ blut0806:而整個TALENs的構成,都是兩兩一組,分別定位在指定的DNA 03/19 16:06
12F:→ blut0806:雙股兩側, 可以這麼辦到是因為TALENs的結構,在一個單元 03/19 16:08
13F:→ blut0806:體中, 重要的部分有二, 一是C端的FokI及整組結構中間的 03/19 16:10
14F:→ blut0806:DNA binding domain,則由約15個胺基酸的重複序列構成 03/19 16:16
15F:→ blut0806:而該重複序列則由約34個胺基酸構成,但其中重要的是第12 03/19 16:19
16F:→ blut0806:及13個,這邊決定了該段所結合的核苷酸對象 03/19 16:22
17F:→ blut0806:結構大概是這樣吧...話說要怎麼用圖片上來? 03/19 16:27
18F:→ blut0806:至於new大你說的那個KIT我也沒有用過QAQ 03/19 16:29
19F:推 mesenchymal:https://www.addgene.org/TALEN/guide/ 03/19 23:37
20F:→ mesenchymal:現在CRISPR正火,因為你只需要的是guide sequence 03/19 23:49
21F:→ mesenchymal:specific binding to DNA element, 不像TALEN需要 03/19 23:50
22F:→ mesenchymal:protein DNA binding (而一些papers claim CRISPR 03/19 23:51
23F:→ mesenchymal:offtarget effect 相對小,Cas9相關paper也幾乎是一個 03/19 23:51
24F:→ mesenchymal:月就可能出好幾篇,應用也不再局限於 gene knockout 03/19 23:52
25F:推 mesenchymal:http://ppt.cc/Y-nQ 你可以看一下這篇討論 ZFN,TALEN 03/19 23:56
26F:→ mesenchymal:還有CRISPR的比較,http://ppt.cc/~HJc 這篇則是較新的 03/19 23:59
27F:→ mesenchymal:CRISPR應用的整理 03/19 23:59
28F:推 datro:力鈞的教學 算上的蠻清楚的 可以去聽看看 03/20 01:32
29F:→ blut0806:M大:我先看下應用那篇, D大:力均是指?拍謝我接住這個領域 03/20 08:46
30F:→ blut0806:沒多久還望海涵諸多不懂. 03/20 08:46
31F:→ blut0806: 接觸 03/20 08:47
32F:推 newmankind:感謝m大資訊,我也來看看 03/20 10:53
33F:推 demoiselle:力鈞現在在促銷CRISPR,舉辦多場workshop,親自參加操 03/20 18:22
34F:→ demoiselle:作ㄧ遍,應該會很有收穫吧! 反正是免費的~相信workshop 03/20 18:22
35F:→ demoiselle:中也會比較幾種傳統的製作方式跟CRISPR的優缺點 03/20 18:23
36F:推 mesenchymal:剛去看了一下poster,發現張鋒lab那套Cas9 knockout 03/21 08:26
37F:→ mesenchymal:creen library未來應用性很大,有興趣可看 03/21 08:27
38F:→ mesenchymal:http://ppt.cc/2qk3 03/21 08:27
39F:推 newmankind:下禮拜成大有辦一場,來去聽聽看 03/21 22:13







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