作者cindy1990032 (怡)
看板Biotech
標題[求救] 尋找pCMV6-Entry Vector
時間Thu Mar 6 15:27:11 2014
各位版友大家好
在此潛水許久
想跟大家求救
是否有人有pCMV6-Entry Vector
是否可以給我一點(菌液或是plasmid皆可)
要當control用的 有查過 買要14400元!!!(origene的 貨號PS100001)
希望有好心版友願意分一點點給我
人在桃園深山 常濕冷的那間學校
希望有北部大學的好心版友願意分一點給我 我可以過去拿 拜託拜託
感激不盡! 代價可議
若有需要 實驗室願意設立正式合作或簽署材料分讓協議
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.94.9
1F：推 APPswe:建議你去addgene找 每隻plasmid只要110美元 兩週就到貨 03/06 22:21
2F：→ blence:何不先用pBluescript或pcDNA3等常見的，等有結果再說 03/06 22:30
3F：→ cindy1990032:有用addgene找過 沒有賣空的vector，不考慮其他 03/07 14:37
4F：→ cindy1990032:Vector是因為買了一個oversepress clone 是在這個 03/07 14:38
5F：→ cindy1990032:vector上，還是有什麼其他方法可以當control?? 03/07 14:39
6F：→ cindy1990032:麻煩版友給點意見?拜託 碩二要畢業了 怕做不完>< 03/07 14:41
7F：→ blence:為什麼不用一般的pcDNA3 vector,等有結果再說？ 03/07 16:50
8F：→ blence:這樣說已經很清楚了,如果同是CMV,size接近,為何不考慮？ 03/07 16:51
9F：→ blence:碩二了,應該不會不知到control目的才對,如果覺得要同backbo 03/07 16:53
10F：→ blence:那也可以質疑你的plasmid size不一樣吧 03/07 16:54
11F：→ blence:雖然可以自製ctrl,但是寧願等也不先考慮其他vector很難理解 03/07 16:57
12F：→ soom:只是要做control的話，把insert切出來，補齊後ligate? 03/07 17:01
13F：→ blence:其實自切很容易,不過會去買clone多少跟cloning熟悉度有關 03/07 17:10
14F：→ blence:尤其是會買價格相對高的oe而非一般cDNA clone,總有時間便利 03/07 17:11
15F：→ blence:度等兩種考量,除非要弄stable,很少堅持只能同一backbone的 03/07 17:12
16F：→ xxtomnyxx:你可以用 High-Fidelity polymerase 把你的 vector 上不 03/08 00:10
17F：→ xxtomnyxx:含 insert 的部分 PCR 出來再用 T4 ligase 接起來，如果 03/08 00:11
18F：→ xxtomnyxx:你想讓它也過量表現個什麼基因當表現控制，就接個 EGFP 03/08 00:11
19F：→ xxtomnyxx:就算把定序的時間也算進來，從你發問到下周一這段時間也 03/08 00:12
20F：→ xxtomnyxx:差不多做的出來了。 03/08 00:12
21F：→ cindy1990032:感謝各位版友建議 讓我多學了很多方法~ 會先嘗試看看 03/10 22:27
22F：→ cindy1990032:我是要建stable 沒錯 謝謝版友們 03/10 22:28