作者ararthur ()
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標題Re: [討論] 跑WB的蛋白質樣品-20可以保存多久?
時間Fri Jan 6 12:33:14 2012
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◆ From: 203.77.65.129
1F：→ a001ou:通常我放3個月就會明顯感受到訊號減弱 但有神人一年樣本 01/02 01:38
2F：→ a001ou:跑起來還是很威 只能說看個人 01/02 01:39
3F：推 dodomilk:每一部作control試試看原因吧 最近還碰過機器壞掉的 01/02 06:56
4F：推 owl628:想順便請問大家,大家覺得protein用SB處理過後保存比較好,還 01/02 11:39
5F：→ owl628:是直接凍在-80,要跑WB前再用SB處理比較好,謝謝~ 01/02 11:40
6F：推 martyrtitan:SB和加熱處理後 protein都變性 而且如果有加inhibitor 01/02 13:50
請問SB洗蝦?
7F：→ martyrtitan:理論上是還滿穩定的... 01/02 13:50
8F：→ martyrtitan:我現在是先定量一批跑internal control 01/02 13:50
9F：→ martyrtitan:如果沒變 那我就分管以sample buffer處理後冰-20 01/02 13:51
10F：推 huhu126:有沒有一個確定的positive control可以用? 01/04 00:24
11F：→ huhu126:另外,是只有你或是少數人做不出來,還是所有人都這樣? 01/04 00:29
12F：→ huhu126:是的話,check一下2抗及substrate 01/04 00:30
13F：推 lovenainai:加laemmli buffer煮過之後放-70至少可以放一年 01/05 03:04
借題請問一下
1.
大家會在protein extract, quantification後
就把全部的protein加入DTT, loading dye 煮過後保存嗎?
-70 or 4oC呢?
2.
另外 我們lab是用DTT和loading dye而已
請問 是否要額外加入SDS呢?
3.
我們放比較久的loading dye會有嚴重沉澱
vortex也不大能溶解 請問有什麼辦法可以解決嗎? 加熱?
謝謝大家:D
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◆ From: 140.112.121.106
14F：→ ooufo:sample buffer~ 01/06 12:36
15F：→ spears135:1.冰-20 2.不用 3.right~Water bath or hot plate 01/06 12:45
16F：推 lovenainai:1. yes 放-70 放-20頂多放一個月就不行了 01/06 13:27
17F：→ lovenainai:2. yes lammeli buffer Tri6.8+sds+bp blue 01/06 13:28
18F：→ lovenainai:3. 加熱 01/06 13:29
19F：推 hangzer:順便問一 下 加熱最多可以到幾度? 01/06 16:20
20F：推 martyrtitan:95度 10分鐘 注意不能煮沸 01/06 16:38
21F：推 hangzer:感謝回答! 01/06 17:35
22F：推 hchs890843:SB=sample buffer, 就那個藍藍的東西XD 01/07 09:12