作者rolajohan (奈奈)
看板Biotech
標題[求救] 請問是否有去除IgG的方法?
時間Sun Jul 10 03:03:24 2011
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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我想要進行免疫沉澱法(IP)，
但是跑完SDS-PAGE之後，
我發現我想觀測的蛋白質位在 56 kd的地方
會被抗體的重鏈給擋住，
會有一條非特異性的 band，
請問有沒有任何方法可以去除或改善呢?
不然我永遠不知道我IP下來的蛋白質表現量是不是有變化
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.27.51.206
1F：推 yuyao:有些公司有在賣，你打電話問一下就可以了。 07/10 07:42
2F：→ trumpet:可以跑nonreducing,就不會overlap到你的target了 07/10 11:06
3F：推 bider:考量到你target protein Ab能否認到non-reducing form的 07/10 14:18
4F：→ bider:epitope 你可以考慮選用不會認reducing form的2抗 或是把 07/10 14:19
5F：→ bider:ProteinA/G與Ab做crosslink 07/10 14:20
6F：→ lupeashn:Pall 有出 IgG Deletion kit.我之前做2D 時有用過!! 07/12 21:00
7F：推 monicatsen:我最近也有這個問題XD 我想請問各位如果我改用二抗使用 08/03 13:19
8F：→ monicatsen:如果一抗rabbit Ab那我二抗用anti-rabbit light chain 08/03 13:22
9F：→ monicatsen:只去認light chain是不是可以避免這個問題 08/03 13:24
10F：→ monicatsen:(上面有點混亂XD sorry) 08/03 13:29