作者qwer0211 (^^)
看板Biotech
標題[方法] 打破細菌萃取蛋白的方法?
時間Thu Apr 28 15:36:18 2011
最近開始要做大腸桿菌生產外源蛋白的試驗
以IPTG誘導後 目前所看到的試驗步驟
都是加入Lysis Buffer後 以超音波震碎儀 打破細菌
可是因為實驗室沒有震碎儀 有爬文看到yeast 可以用 glass beads打破
請問這個適於大腸桿菌嗎?
或者有其他方法可以用?
還是我可以加 Lysis buffer就好
麻煩大家解惑 謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.69.75.186
1F：推 FENOR:你直接用urea就好了 04/28 17:30
2F：→ FENOR:先用TNE，然後丟入液態氮裡面，反覆解凍三次 04/28 17:30
3F：→ iceking:破菌的方法很多,google很好找 04/28 22:35
4F：推 christymei:yeast是因為有細胞壁 所以才需要glass beads 04/29 23:36
5F：→ christymei:如果實驗室經費很夠 也推薦PIERCE的B-PER 挺好用的 04/29 23:36
6F：推 alaric:理論上, lysis buffer就可以了, 之後需加DNase, 也可以加.. 05/02 01:42