作者pomelogirl (等ㄧ個人‧解放深鎖‧心)
看板Biotech
標題[求救] membrane protein
時間Mon Jan 10 18:02:22 2011
關於membrane protein extract的問題
我最近要壓的蛋白，一直跑出兩條band，兩條位置很相近
去查了文獻以後，發現那個protein有兩個form
一個是soluble form，屬於transient 存在的
(從cytosol 接上lipid 就會bind到膜上)
另一個是membrane-bound form，就是我想要壓的
板上大家都說 加入tritonX-114或tritonx-100
可以請問有具體的protocol嗎?我想要試試看
我目前是將細胞用RIPA刮下，放24hr離心跑western
假設要再抽membrane 的protein
我該加什麼?濃度?離心條件等等?
我在一些文獻中看到的方法都好複雜= =
拜託大家幫忙了~"~
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◆ From: 203.64.247.100
1F：推 liuse:上超高速離心 分離membrane/cytosol protein 01/10 22:35