作者churchfire (別小看我...)
看板Biotech
標題[求救] 請問ISSR的PCR
時間Fri Nov 5 18:14:42 2010
ISSR的實驗
PCR條件:
template: Genomic DNA : 20ng
primer: 0.8UM
94度 3mins
----------------
以下35cycles
94度 30s
50度 30s
72度 2mins
----------------
72度 7mins
4度 保存
有些跑出來會這樣!
下 10ul去跑的膠
會什麼會有一大坨在上面?
正常嘛?
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808507&p=1
另外如果下5ul也是一樣!有smear!!
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808505&p=0
麻煩解答依下!!
會不會是DNA太雜了!!所以,P出依推東西,所以smear!!
在ISSR中這樣的primer就不要用了!!!謝謝!!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.69.175.253
1F：→ scorpiuswu:你的推論可能是對的,懷疑是在PCR過程的非專一性反應 11/08 15:20
2F：→ scorpiuswu:只有特定的lane會smear,看起來應該不是templet加太多XD 11/08 15:20