作者churchfire (别小看我...)
看板Biotech
标题[求救] 请问ISSR的PCR
时间Fri Nov 5 18:14:42 2010
ISSR的实验
PCR条件:
template: Genomic DNA : 20ng
primer: 0.8UM
94度 3mins
----------------
以下35cycles
94度 30s
50度 30s
72度 2mins
----------------
72度 7mins
4度 保存
有些跑出来会这样!
下 10ul去跑的胶
会什麽会有一大坨在上面?
正常嘛?
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808507&p=1
另外如果下5ul也是一样!有smear!!
http://www.wretch.cc/album/show.php?i=wcc28895129r&b=1&f=1294808505&p=0
麻烦解答依下!!
会不会是DNA太杂了!!所以,P出依推东西,所以smear!!
在ISSR中这样的primer就不要用了!!!谢谢!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.69.175.253
1F：→ scorpiuswu:你的推论可能是对的,怀疑是在PCR过程的非专一性反应 11/08 15:20
2F：→ scorpiuswu:只有特定的lane会smear,看起来应该不是templet加太多XD 11/08 15:20