作者secretcode (就是生命美)
看板Biotech
標題[求救] 2D IEF電壓上不去
時間Thu Jul 8 15:46:54 2010
最近我跑IEF 電壓頂多到四五千
沒有辦法到八千
所以我就用TCA/acetone沉澱
步驟是加入蛋白三倍體積冰冷10%TCA/acetone
再放入-20度冰箱靜置一小時 拿去離心
可是都沒看到pellet 是因為蛋白濃度太低嗎
蛋白濃度大約2ug/ul
之後拿去跑IEF 電壓仍然上不去
所以跑出來當然沒什麼點
後來我就用細胞來跑IEF
電壓可以上升到八千 所以不是機器的問題
應該是SAMPLE的關係
請問該怎麼解決這問題?! 或是有什麼建議
拜託幫幫我 謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.117.39.98
1F：推 ookubo:能把機器跟樣品設定的條件寄給我嗎？ :P 07/08 15:51
2F：→ jepy:P哥好熱心 07/08 21:54
3F：推 CErline:沒看到pellet怎麼wash? 沒有wash怎麼去鹽? 07/09 00:44
4F：推 asmusic:salt太高吧 07/10 03:07