作者pei24 (黑哥)
看板Biotech
標題[求救] 切片破洞很久了!!!請幫幫我
時間Thu Feb 4 00:08:53 2010
請問各位實驗經驗豐富的前輩
1. 組織可以不經由perfusion,直接取下來泡在 4% PFA內嗎???
泡完 4% PFA之後再泡30% sucrose....再進行冷凍切片
2. 組織是小鼠的spinal cord L4-L6, 這樣泡在 4% PFA內至少需要多少小時??溫度??
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由於我的切片破片已經持續一個半月了 我不想再繼續破下去了..
覺得perfusion很耗時
因此才想說有沒有可以不經由perfusion直接來個固定的方法?
希望各位前輩給予指教...
PS:依照我實驗室的perfusion protocol,一隻小鼠需要耗時1.5小時
實在是很耗時...../_\ (一天灌個幾隻就天黑了)
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◆ From: 192.192.93.175
1F：→ vandia:1.可以,可是組織內的氣泡要完全弄出來(可低壓抽氣) 02/04 10:36
2F：→ vandia:2.你是一整條嘛? 組織太大塊固定效果也不好,要不要切小塊 02/04 10:37
3F：→ vandia:切片破洞的原因可能有很多,你有沒有先確定不是其他問題? 02/04 10:39
4F：→ vandia:比如說,刀片太鈍...之類的 02/04 10:39
5F：→ vandia:可以給我看看你切片破洞的照片嘛? 這樣比較好推測 02/04 10:40
6F：推 thuglife1020:我大鼠一隻大概30~40分 你要一個半小時???? 02/04 11:07