作者deliciosa (I HOPE...)
看板Biotech
標題[求救] 請問EMSA使用的probe
時間Tue Feb 2 17:48:33 2010
請教大家一個有關EMSA的問題。
因為現在我必須要在動物組織中證明,某一個transcription factor(CREB)
與BDNF promoter有結合。所以想使用EMSA證明 (Panomics)。
但在詢問產品專員的結果是還要另外請人合成一段biotin-labled
BDNF promoter ds sequence。
那這樣不就等於 只是證明CREB與BDNF promoter有(無)結合;但並非用來證實
在我的實驗condition之下,CREB 的確有(無)與BDNF promoter結合。
所以現在是不是必須要自己設計primer,然後將tissue中的BNDF promoter sequece
放大並lable上biotin。
麻煩各位幫我解答,謝謝!
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◆ From: 140.116.60.98
1F:推 Fourfish:用PCR放大 做EMSA用EtBr染DNA就好 不一定要label biotin 02/02 18:50
2F:→ Fourfish:是DNA用量需要高一點 50ng即可肉眼觀察 02/02 18:53