作者sonnet77 (蘇娜)
看板Biotech
標題[求救] about nest pcr
時間Fri Jan 22 11:41:21 2010
大家好
最近實驗上遇到一些瓶頸
想請大家集思廣益討論一下
我同學在做Nested PCR
將 RT 好的 cDNA 進行第一次PCR 接著在進行 Nested PCR
跑膠出來有 band
隔天我再將第一次 PCR 的產物再做一次 Nested PCR
跑膠卻沒有 band
這是為什麼呢?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 210.241.43.125
1F:推 ookubo:會不會是第二次的templete濃度太高? 01/22 20:36
2F:→ silverberry:倒數第三行 第一次 PCR 的產物再做 Nested PCR 01/24 16:38
3F:→ silverberry:是說用和 RT 好的 cDNA 進行第一次 PCR 時一樣的 01/24 16:38
4F:→ silverberry:primer 嗎? 01/24 16:39
5F:→ sonnet77:我同學她這兩次做的不同的地方在..第一次PCR後當天跑第二 01/25 10:59
6F:→ sonnet77:次nested pcr 在當天跑膠就有band..但是如果把第一次pcr 01/25 11:00
7F:→ sonnet77:product放到隔天在跑第二次的nested pcr 在跑膠就沒有ban 01/25 11:01
8F:→ sonnet77:d..覺得應該都會有band才是.. 01/25 11:03