作者faycos (fay)
看板Biotech
標題[方法] 皮膚組織均質
時間Mon Jan 18 16:57:21 2010
最近需要均質小鼠的皮膚組織
參考很多篇paper和碩博論文都只簡單的寫"利用XX均質機將組織均質"
可是我實際均質發現皮膚很堅韌,
打了10分鐘組織還是一塊一塊的卡在均質機上
不會像其他組織變成米漿狀
有人有比較好的方法嗎? 謝謝
我是先把皮膚組織剪得碎碎的
加PBS再用均質機均質
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◆ From: 140.128.64.100
1F:→ allisa:我是先剪碎 再用液態氮急凍 用eppendorf專用研磨棒搗碎 01/18 18:00
2F:→ allisa:加lysis buffer再用研磨棒磨一下 提供當參考(毛髮少一點好) 01/18 18:02
3F:→ vandia:應該要找小鼠的homogenize medium 01/18 19:30
4F:→ kotenka:原PO你做的實驗都跟我好像XD 我跟一樓差不多,犧牲時剪碎 01/19 00:09
5F:→ kotenka:用鋁箔紙包起來,丟到液態氮裡面;回到實驗室之後用研磨棒 01/19 00:10
6F:→ kotenka:磨成粉末(杵跟臼事前都先放進-80度冰箱預冷),在臼裡面加 01/19 00:11
7F:→ kotenka:500的trizol,因為環境很冷所以會馬上凝固,就可以用工具 01/19 00:11
8F:→ kotenka:夾到eppendorf裡面,這時就可以用均質機磨,過程中也要一 01/19 00:13
9F:→ kotenka:直放在冰上,不可以連續磨太久不然溫度會升高;最後再加入 01/19 00:13
10F:→ kotenka:500的trizol。 (如果一開始就加1000的trizol,在均質的時 01/19 00:14
11F:→ kotenka:候會濺出來) 參考一下:) 01/19 00:14