作者fhtb (開心的過每一天)
看板Biotech
標題[求救] western blot transfer問題
時間Thu Jan 7 12:02:56 2010
各位大大好~
想問western blot transfer問題
我是用bio-rad濕式轉印槽，電壓 100 V，90 min
我的問題是，我是一次transfer 二片膠
最近跑western的時候在transfer完後，
放靠正極的那片模，常常marker轉印過去後都會像毛毛蟲樣
歪七扭八的，不知道有什麼原因為造成這樣的結果，
而且壓片的時候，band也常常會有斷裂或是缺角的情況發生
不知道有沒有人有這樣的情形發生可以幫幫我解答一下
有想過是不是膠沒做好的關係，但是因為二片膠是同時做的
所以覺得不太可能，也有想過是不是transfer buffer的關係
但是另一片又transfer和壓出來都很正常，另一片總會怪怪的~
希望知道原因的各位幫幫我一下囉~謝謝~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.71.94.31
1F：推 celestial318:換個位置試試 01/07 12:30
2F：→ fhtb:換個位置？？ 01/07 12:36
3F：推 yum531:或許您可以看看transfer tank的電路有無損壞 XD 01/07 16:33
4F：→ soceress:換個位置, 斷掉或缺角也有可能是有泡泡,還有一個是它可能 01/07 17:52
5F：→ soceress:呈啞鈴狀,那有另一個原因可是我現在不記得XDDDD 01/07 18:46
6F：→ reinherd:這聽起來跟幾片膠似乎沒關係 好像跟電流或是氣泡有關 01/07 18:53
7F：→ soceress:還有可能是膠縮了 (我之前請教過大家) 試看看先把膠泡在 01/07 19:07
8F：→ soceress:transfer buffer中平衡一下再夾 01/07 19:07
9F：→ fhtb:可是我的膠有在transfer buffer中平衡過才夾的~ 01/07 23:03