作者boblu (六百)
看板Biotech
標題Re: [求救] Western Blot出來的band不清楚
時間Thu Dec 24 01:17:42 2009
我很好奇 那些白點你怎麼這麼確定不是 transfer 有泡
以前沒有現在有 但是你各試過幾次呢？ 會不會是剛好沒夾好？
所謂水痕可能性很多
avtivate 不均勻, transfer 不均勻, block 不均勻都有可能
另外處理 membrane 的過程裡面有沒有不小心沾染油脂？
整個過程中使用的buffer 有沒有長什麼怪東西？
band 模糊
另外 我注意到你的結果,
target protein 下面還有一條 band（是intenal control嗎？）很漂亮
所以估計不是 PAGE run 不好的問題
一個可能是膠片的濃度不適當
另一個可能則是你的 target protein 真的就是這樣......
訊號弱
版友建議的增加loading, 增加抗體同度，改變反應溫度與時間都可以試試看
不過也要考慮 "你要染的這個 protein 真的就是這樣" 這種可能性
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