作者g010377 ()
看板Biotech
標題[討論] 關於幾個RNAi和western的基本問題
時間Mon Nov 23 15:20:40 2009
身為研究生這幾個問題到現在還不太了解
真的很汗顏
我對以下這3個名詞有一點confuse :
miRNA siRNA shRNA
有去看了幾篇review 這三個東西似乎造成共同的現象:RNA interference
miRNA一般都是cell endogeneousRNA interference 一般都用在plant cell和
fly embryo development相關的研究
siRNA通常是RNA oligomers 送入細胞造成RNA interference
shRNA則是利用一個plasmid送入細胞 表現出noncoding RNA 然後造成RNA interference
不知道我這樣的認知是否正確? 歡迎板上的先進指教
另外還有一個很疑惑的問題
一般作western時
加入2-ME和loading dye之後會去煮sample
將protein變成linear polypeptide
之後SDS-PAGE transfer 上一抗
我很疑惑的就是 既然protein變成linear form
那抗體怎麼去辨認他? 抗體一般不是辨認特定的folding structure嗎?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
1F：推 Seal13:這些問題 好像自己上網查會有答案喔~...... 11/23 15:22
2F：推 chvkimo:western 那個問題..就看當初抗體製作時是認structure 或 11/23 16:19
3F：→ chvkimo:amino acid ,買抗體的時候網頁資料都會註明 適合westen或 11/23 16:22
4F：→ chvkimo:是 適合IP 11/23 16:22
5F：推 turtle24:用linear epitope產生的抗體就會認linear protein囉 11/23 18:25
6F：推 chvkimo:yes,不過應該說是 peptide, 感覺linear epitope說法很怪^^ 11/23 20:25
7F：→ chvkimo: polypeptide 11/23 20:25
8F：→ turtle24:啊啊..可能算我實驗室內的用語不太一樣吧 11/23 23:10
9F：推 chvkimo:呵呵 因為我沒聽過 我也不知道有沒有這種說法 11/24 15:17
10F：推 chvkimo:我google了一下,還真的有linear epitope這種用法,等於 11/24 15:21
11F：推 chvkimo:primary structure, 而3D sharp = tertiary structure 11/24 15:24
12F：推 andersenlee:RNAi的問題 你問得很模糊 應該找幾個具體的比較點 12/03 01:04
13F：→ andersenlee:看review的時候注意這三類RNA如何產生...位置在哪... 12/03 01:06
14F：→ andersenlee:形狀如何...產生RNAi的機制及影響...影響的時間長短.. 12/03 01:07
15F：→ andersenlee:如果還是不懂 應該有書籍可先看 先不用看review 12/03 01:08