作者kinray (just do it)
看板Biotech
標題[求救] 如何將感染後的細胞及細菌分離???
時間Fri Sep 18 18:59:49 2009
小弟目前遇到一些問題
利用病原菌感染魚類細胞株，希望在感染過後
看胞內蛋白的表現，但希望能夠感染後將病原菌和細胞分離
這樣可以單純看其胞內蛋白的表現
我想知道有沒有方法可以分離，細胞株不限制
主要是細菌感染細胞就OK
不知道有沒有人再做這方面的實驗，或者有哪方面的paper可以參考
我有用過 infection proteomic bacterial 等 key word 在NCBI收尋
不過似乎沒有我想要的paper 好像很少人做這方面的實驗
不知道板上的大大，知道國內或國外有誰在做這方面的東西
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◆ From: 120.101.28.123
1F：推 inchew:無參考文獻，純粹提供idea:利用細菌與細胞離心所需轉速的 09/18 21:23
2F：→ inchew:轉速的不同 ex.細菌通常需3000rpm以上，細胞只需800rpm左右 09/18 21:24
3F：→ inchew:抱歉耍笨orz,我指的是尚未感染進入細胞的細菌分離方式 09/18 21:27
4F：推 Lowrider:用磁珠阿....只要抓細胞嘛 @@? 09/19 01:16
5F：推 chvkimo:若是細菌感染細胞會抓著細胞不放,離心只能將未抓住細胞的 09/19 09:06
6F：→ chvkimo:細菌與細胞分開,但是最多也只能這樣了 09/19 09:08
7F：→ chvkimo:另外一個方法就是加入含有抗生素的培養基殺細菌,但是前提 09/19 09:09
8F：→ chvkimo:是這個細菌可以用相對的抗生素毒殺,缺點是收細胞的時間點 09/19 09:10
9F：→ chvkimo:難以定義 09/19 09:10
10F：推 leoblack:不能很單純的用2組,1組有感染,1組mock來做比較嘛?! 09/19 11:49
11F：→ kinray:用抗生素的方法目前已經在做 09/21 10:41
12F：→ kinray:真的如你所說，時間點難抓，我們的目的就是要看host cell在 09/21 10:44
13F：→ kinray:被細菌感染後，蛋白的表現，只是抗生素會將host也殺掉，因 09/21 10:45
14F：→ kinray:此再找其他方法分離 09/21 10:45
15F：推 chvkimo:還有一個方法,如果你們萃取的蛋白的方法不會收到細菌的 09/21 11:04
16F：→ chvkimo:蛋白的話,也許就不會影響實驗~ 09/21 11:05
17F：→ chvkimo:當然若要如此做之前還是要先測試看看 09/21 11:05
18F：推 tsubasawolfy:把HOST改造成抵抗抗生素? 09/21 11:28
19F：推 chvkimo:改造~是可以考慮,但是可能會把實驗複雜化 09/21 11:51
20F：推 tsubasawolfy:只是多一步把resistant vector送進去後做stable clon 09/21 13:23
21F：→ chvkimo:好像也是~ 呵呵 不過這要在原PO使用抗生素去除菌 的前提下 09/21 13:49
22F：→ chvkimo:但是使用抗生素除菌 比較無法確認菌是否真的都去除了~呵 09/21 13:51