作者kinray (just do it)
看板Biotech
标题[求救] 如何将感染後的细胞及细菌分离???
时间Fri Sep 18 18:59:49 2009
小弟目前遇到一些问题
利用病原菌感染鱼类细胞株，希望在感染过後
看胞内蛋白的表现，但希望能够感染後将病原菌和细胞分离
这样可以单纯看其胞内蛋白的表现
我想知道有没有方法可以分离，细胞株不限制
主要是细菌感染细胞就OK
不知道有没有人再做这方面的实验，或者有哪方面的paper可以参考
我有用过 infection proteomic bacterial 等 key word 在NCBI收寻
不过似乎没有我想要的paper 好像很少人做这方面的实验
不知道板上的大大，知道国内或国外有谁在做这方面的东西
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◆ From: 120.101.28.123
1F：推 inchew:无参考文献，纯粹提供idea:利用细菌与细胞离心所需转速的 09/18 21:23
2F：→ inchew:转速的不同 ex.细菌通常需3000rpm以上，细胞只需800rpm左右 09/18 21:24
3F：→ inchew:抱歉耍笨orz,我指的是尚未感染进入细胞的细菌分离方式 09/18 21:27
4F：推 Lowrider:用磁珠阿....只要抓细胞嘛 @@? 09/19 01:16
5F：推 chvkimo:若是细菌感染细胞会抓着细胞不放,离心只能将未抓住细胞的 09/19 09:06
6F：→ chvkimo:细菌与细胞分开,但是最多也只能这样了 09/19 09:08
7F：→ chvkimo:另外一个方法就是加入含有抗生素的培养基杀细菌,但是前提 09/19 09:09
8F：→ chvkimo:是这个细菌可以用相对的抗生素毒杀,缺点是收细胞的时间点 09/19 09:10
9F：→ chvkimo:难以定义 09/19 09:10
10F：推 leoblack:不能很单纯的用2组,1组有感染,1组mock来做比较嘛?! 09/19 11:49
11F：→ kinray:用抗生素的方法目前已经在做 09/21 10:41
12F：→ kinray:真的如你所说，时间点难抓，我们的目的就是要看host cell在 09/21 10:44
13F：→ kinray:被细菌感染後，蛋白的表现，只是抗生素会将host也杀掉，因 09/21 10:45
14F：→ kinray:此再找其他方法分离 09/21 10:45
15F：推 chvkimo:还有一个方法,如果你们萃取的蛋白的方法不会收到细菌的 09/21 11:04
16F：→ chvkimo:蛋白的话,也许就不会影响实验~ 09/21 11:05
17F：→ chvkimo:当然若要如此做之前还是要先测试看看 09/21 11:05
18F：推 tsubasawolfy:把HOST改造成抵抗抗生素? 09/21 11:28
19F：推 chvkimo:改造~是可以考虑,但是可能会把实验复杂化 09/21 11:51
20F：推 tsubasawolfy:只是多一步把resistant vector送进去後做stable clon 09/21 13:23
21F：→ chvkimo:好像也是~ 呵呵 不过这要在原PO使用抗生素去除菌 的前提下 09/21 13:49
22F：→ chvkimo:但是使用抗生素除菌 比较无法确认菌是否真的都去除了~呵 09/21 13:51