作者dullish (tombow )
看板Biotech
標題[求救] 請問 PC12 細胞株冰凍方法 (以爬文)
時間Thu Aug 20 17:39:49 2009
小妹我細胞冰凍保存常失敗
細胞一解凍似乎都活不了
使用的 medium 為 RPMI1640 + 10%HS 與 5%FBS
細胞冰凍液為 medium + 7% DMSO
4 度C 30分鐘 -20 度C 再 30 分鐘 置於抗凍盒後 -80 over night
細胞再次解凍後都活不成
想請問有各位先進養過一樣的細胞嗎!?~ 可以分享一下訣竅
代 po
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◆ From: 192.192.93.56
1F：推 bigcat24:先確定細胞狀況好再凍~另建議冷卻時間可拉長 serum放多點 08/20 19:15
2F：推 afk2768:改成純FBS+10%DMSO 應該就沒問題了, 個人經驗 08/20 20:58
3F：→ toocool5941:冷凍前細胞培養不能長太滿，約8分滿 08/20 22:32
4F：→ toocool5941:media加10~20%FBS可抗氧化 08/20 22:33
5F：→ toocool5941:DMSO常溫下有毒，所以速度要快 08/20 22:33
6F：→ toocool5941:4度後直接到-80 08/20 22:34
7F：→ sharkcell:我有漸凍盒後都直接丟-80 08/22 18:32
8F：推 chvkimo:原PO-80之後 不放液態氮? 08/22 20:44
9F：推 xeiko:想問一下你加DMSO的操作步驟? 08/24 01:17
10F：推 LAZY944:我也用純FBS+10%DMSO,解凍後都很OK 09/07 20:39
12F：→ sneak: m 01/03 17:00