作者dullish (tombow )
看板Biotech
标题[求救] 请问 PC12 细胞株冰冻方法 (以爬文)
时间Thu Aug 20 17:39:49 2009
小妹我细胞冰冻保存常失败
细胞一解冻似乎都活不了
使用的 medium 为 RPMI1640 + 10%HS 与 5%FBS
细胞冰冻液为 medium + 7% DMSO
4 度C 30分钟 -20 度C 再 30 分钟 置於抗冻盒後 -80 over night
细胞再次解冻後都活不成
想请问有各位先进养过一样的细胞吗!?~ 可以分享一下诀窍
代 po
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◆ From: 192.192.93.56
1F：推 bigcat24:先确定细胞状况好再冻~另建议冷却时间可拉长 serum放多点 08/20 19:15
2F：推 afk2768:改成纯FBS+10%DMSO 应该就没问题了, 个人经验 08/20 20:58
3F：→ toocool5941:冷冻前细胞培养不能长太满，约8分满 08/20 22:32
4F：→ toocool5941:media加10~20%FBS可抗氧化 08/20 22:33
5F：→ toocool5941:DMSO常温下有毒，所以速度要快 08/20 22:33
6F：→ toocool5941:4度後直接到-80 08/20 22:34
7F：→ sharkcell:我有渐冻盒後都直接丢-80 08/22 18:32
8F：推 chvkimo:原PO-80之後 不放液态氮? 08/22 20:44
9F：推 xeiko:想问一下你加DMSO的操作步骤? 08/24 01:17
10F：推 LAZY944:我也用纯FBS+10%DMSO,解冻後都很OK 09/07 20:39
12F：→ sneak: m 01/03 17:00