作者ararthur ()
看板Biotech
標題[求救] mutagenicity assay
時間Mon Jul 6 14:28:47 2009
本身實驗室並不是在作mutation實驗的
但因為計畫題目關係
所以接下了一個實驗
是測試一些mutagen對E.coli的致突變性
本來用的方法是以對抗生素的抗性能力之改變作為突變的基準參考點
用最基本的LB agar加上tetracyclin
把condition調至菌的濃度與抗生素的濃度可以讓Colonies控制在50~100之間以便計算
然後分別以control和加了mutagen的菌液去塗盤
可是不管怎麼做Control和實驗組的Colony數都無法有個明顯差距@@
--以上是前言--
1.看了一些paper有些裡面用的medium是minimal的
請問有沒有什麼差呢??
2.大部分的實驗設計都是transform一段plasmid來搞reverse mutation
可是這個實驗應該不會成為最後的碩士論文題目
所以有些不想動用到transform
不曉得這樣的情況有沒有人有什麼建議
是否這樣的實驗一定得用到transform一個plasmid進去呢??
3.請問有沒有比較經典針對mutagenicity assay for E.coli的方式或完整paper呢?
找到的paper的ref.不是年代很久遠沒有全文就是用複雜的系統...
如果真的找不到 應該就會用transform plasmid的方式了
先謝謝各位的意見
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◆ From: 140.112.125.84
1F：→ blence:是不是缺乏已被驗證的mutagen當作p.c.? 說不定你的mutagen 07/06 14:43
2F：→ blence:無效,或在你使用的濃度不見得有效 07/06 14:43
3F：→ ararthur:嗯 可是我用的現在還是已證實過的mutagen MMS和EtBr耶 07/06 15:09