作者SPK (雲淡風輕)
看板Biotech
標題Re: [求救] 高劑量G418殺不死CHO及MB-231
時間Sun Jun 28 01:16:09 2009
※ 引述《wenhaoshen (wenhaoshen)》之銘言：
: 我使用剛配Sigma G418 (400ug/ul) select CHO-K1及MDA-MB-231,
: 有做不同的dilution劑量及細胞數,
: CHO-K1長很快,
: CHO-K1抓出來是1000ug/ul...但挑clone時候殺不太死CHO細胞,
: 後來調到1600ug/ul
: 而MDA-MB-231用1400 ug/ul G418去殺各不同dilution細胞數
: 連最低細胞數都殺不死
: 各位可提供我好用又純又高劑量的G418 liquid,不是powder喔.
: 我去查都只有50mg/ml劑量...不知道有沒有更高劑量可推薦呢?
: 謝謝
……我真的很驚奇你的細胞這麼“強壯“要用到這麼高劑量的G418~
我是覺得第一你的G418有沒有配錯，第二你的KILLING CURVE有沒有做好~
還有，怎麼會是在開始做transfection selection的時候再調一次G418的濃度呢？
這樣實驗不就有很嚴重的基準點問題了嗎？喔，對了，這跟細胞長不長得快沒有關係~
最後，連最低細胞數都殺不死？？我覺得你可能拿錯藥了，那不是G418~~
更或者，你的細胞是從那來的？確定沒被動過手腳嗎？
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◆ From: 219.69.66.235
1F：→ wenhaoshen:我也覺得很奇怪,G418對長得快的細胞很難殺 06/28 01:58
2F：→ wenhaoshen:絕對沒拿錯藥,我想可能要重新重抓Killing Curve@@ 06/28 01:59
3F：推 leoblack:之前對於長很快的細胞~我們會用G418+FBS減半~效果不錯 06/28 09:24
4F：推 aceliang:G418本身就是蠻強的藥了...原po濃度都可以勾芡了 06/28 10:07
5F：推 bluep:推aceliang大，都可以勾芡了...哈 06/28 11:33
6F：推 westernblot:如果真的加1000mg/ml，細胞都鹹死了...囧a 06/28 14:22