作者leoblack (朋友看太重的猫)
看板Biotech
標題[求救] cDNA需要做純化測濃度才準嘛!?
時間Tue Jun 9 14:18:19 2009
其實是個小問題啦
將mRNA經RT轉出的cDNA~是否要先經過處理(例如RNase H把RNA切光光)後~
再去測cDNA濃度~值才會比較精準可信呢?!
還是大家都是直接把跑完RT的那個mixed product直接去測濃度呢?!
感謝~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 192.192.93.165
1F：推 kotenka:我們cDNA沒有在測濃度的耶 06/09 15:35
2F：→ leoblack:由於接下來的cDNA要拿去做semi-Q~所以需要做定量~ 06/09 16:08
3F：→ leoblack:雖然在一開始的mRNA就已經做過定量了~但發現cDNA的量還是 06/09 16:08
4F：→ leoblack:會有些差異~所以再做一次定量 06/09 16:09
5F：推 hek:你轉cDNA的時候加入的dNTP會干擾最後定量, 建議你盡量用同一批 06/09 20:14
6F：→ hek:等量mRNA轉出的cDNA去作QPCR,最後再以internal control修正 06/09 20:15