作者DJHINN (dj)
看板Biotech
標題[求救] 求救TM值
時間Thu May 21 17:21:49 2009
我有個問題
請問 這個PRIMER怎麼計算
ATGiiiiiii
後面加了 7個inosine
但是我沒辦法用線上計算軟體計算Tm值
請有使用過這種primer的大哥 可以幫忙一下
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◆ From: 140.112.80.3
1F：→ huangsw:直接用gradient PCR做一次？ 05/21 20:19
2F：推 andy731:這個primer只有10個mer嗎? 若是這麼短的話 試試看40度 05/21 21:33
3F：→ andy731:若無產物的話 溫度只好再降嚕~ 不需要用到gradient PCR做 05/21 21:34
4F：→ andy731:建議配一管大量的約50~100ul template加多一點 然後分成20 05/21 21:36
5F：→ andy731:ul每試一次溫度 就取出一管 剩下的置於冰上備用 05/21 21:37
6F：→ andy731:template量加得多的話~相對的cycle數就可以降低 跑20~25即 05/21 21:37
7F：推 captdavince:你好..請問一下這個primer是出自別人用過的嗎? 05/22 02:22
8F：→ captdavince:看起來是對start codon後面的product做放大? 05/22 02:23
9F：推 captdavince:疑...我好像看錯了.. 05/22 04:18