來這個版看的時間不長 當初是因為有新的實驗要做 所以希望在這裡可以有經驗的人給點指導 但是除了已經熟知的實驗之外 對於其他不熟悉的實驗即使點進去看也是一知半解 除了自己正在接觸或著做過的實驗之外 我也會在版上瀏覽一些期刊文 雖然常常有人po期刊和簡介 但是吸引人一起討論的風氣卻沒有在版上揮發 不見得是沒有人肯討論 也許有人要了msn或電話就研究起來也說不定 既然是版友 在這個版除了自己的實驗經驗討論之外 新的技術或著不同的實驗也會希望能夠多了解一點 但是一篇論文如果跟自己所做的題目和領域差異過大 即使是一篇很有趣的paper 要讀通它 可能也要花不少的時間查backgound和原理 查paper除了查詢別人實驗的原理和步驟之外 有時候也會因為meeting或上課的關係而去接觸一些比較生疏的領域 雖然上台報告的時候擺出信心十足的架式 但是未必每一個細節和原理都能夠來的及詳察和理解 不訪把這樣的文章分享出來一起討論 除了補足不足之處 也可以讓更多人分享學習 希望大家可以分享一些正在看的 最近看過的 或著以前看過的文章 並且能夠對於result和conclusion簡單的說明 讓不同領域的人比較容易理解的方式分享這些內容 [期刊分享] Molecular cloning and characterization of a novel alpha-galactosidase gene from Penicillium sp.F63 CGMCC 1669 and expression in Pichia pastoris. Enzym Microb Tech 40 (2007) 1373-1380 http://tinyurl.com/ouztrx [簡介] 把Penicillium sp.F63 CGMMCC 1669(真菌)中的alpha-galactosidase基因轉殖到Pichia (酵母菌)中表現，並對酵素做一系列酵素性質測定，以及物種比較。 [實驗結果和討論] 1. 因為酵素分子量比一般蛋白質大很多，因此在蛋白質純化步驟上native的酵素和轉殖 重組後的酵素純化步驟相同，不需要改變或著使用更專一性的column 2. 細菌表現到第六天活性仍未達最高點，所以這個酵素的產率還可以更高，而且酵素的 比活性是所有alpha-galactosidase中最高的，因此培養單位體積得到的酵素單位數 也是目前(2007)最高的。 3. Cu2+，Mn2+和SDS對於酵素活性有高度抑制，而Ag+和Hg+則是完全抑制。 4. 此酵素對於網狀galactose聚合物完全無法分解 [心得或賣點] 這篇論文對於酵素純化後重組的原理寫的相當詳細，算是做酵素cloning的基本樣本，如 果對gene cloning有興趣的或著也在做的歡迎回文討論~~~ [mail] [email protected] --

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