※ 引述《raxjimmy (rearrangement)》之銘言： : 有幸要開始抽RNA了 : 上次也問過大家知道直接抽total RNA就可以了 : 因為我們很久沒做過 : 所以我去別人實驗室問他們的做法 : 他們用具是開一套新的塑膠離心試管在RNA區專用 : 而玻璃器材等等就用DEPC水用噴霧噴噴擦一擦然後滅兩次菌 : tip則是直接滅兩次菌 : 這樣會太簡陋嗎? : 話說說我們的老闆嚴格多了XD : 剛處理完一批東西被罵 : 老闆說要全部浸泡DEPC水 : 而且連tip也要泡 : 簡單的說就是要用什麼就全部都泡水 : 泡完水全部都用150度烘五個小時(除了會溶化的) : 烘完之後再全部拿去滅菌 : 滅菌之後再全部拿去烘5小時 : 這兩個超極端的...... : 讓我有點不太能適應= = : 所以想請問一下各位RNA專用器材都怎麼處理的 其實真的不用太害怕 尤其假如你是用trizol抽的話 裡面就含GUANIDINE THIOCYANATE 是RNase的inhibitor critical point是在加insopropanol後 因為沒有GUANIDINE THIOCYANATE保護 像推文說得你假如是用水+DEPC處理overnight 接著滅菌後的水 只是裡面沒有RNase 拿來噴東西沒有任何用 假如你說用水+DEPC後沒滅菌前拿來噴用具 那些用具再拿來滅菌 照理說應該可以去RNase 但DEPC會致癌耶 你真的要這樣做嗎 難道你全部都要在hood操作? 只是增加麻煩罷了 以下有篇ambion(abi)的文章 RNase and DEPC Treatment: Fact or Laboratory Myth http://www.ambion.com/techlib/tb/tb_178.html 裡面指出滅菌也可以去除一定程度的RNase 而且還有許多處理RNA相關的基礎知識 可以看看 我之前也研究了很久 所以我覺得手法還是比較重要拉 跟無菌操作一樣 會污染的人就是會汙染 噴再多酒精 點再多酒精燈都一樣 我以前老闆都不太噴酒精也不點酒精燈的 也不會汙染 --

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