作者newpostt (T.T)
看板Biotech
標題[求救] PCR 產物定序
時間Wed Mar 11 11:13:51 2009
我之前送PCR product去定序
第一次出來結果是messy
結果我又送一次一模一樣的東西
第二次出來反而是好的@@
這樣的事情發生至少五次了
我在想到底是什麼原因造成這樣
首先當然有可能是他們機器的問題
(目前還在等他們的回應)
以下是我天馬行空的猜測
一開始送的DNA濃度太濃
等過幾天DNA degrade反而剛好??
還是跟DNA溶解或是其中鹽的濃度有關
我一般流程PCR-->PCR clean up-->sequencing
PCR clean up 完需要等待嗎???
我都立刻送sequencing
有版友發生過類似的問題嗎
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 160.39.50.106
1F：推 sGoat:出現雜訊是因為他們定序PCR沒做好吧 03/11 11:33
2F：→ newpostt:我也是這麼想 但是出現很多次 第一次失敗 隔幾天就成功 03/11 11:35
3F：→ newpostt:一模一樣的sample 就不知道是不是有其他原因 03/11 11:35
4F：推 sGoat:這種情形跟如何維護機器運作還有上機程序有關,問一下廠商吧 03/11 12:37
5F：推 jademan:換一家吧 03/11 20:57
6F：推 chemsp:應該是定序的毛細管太髒了 會又雜訊出現 03/11 20:58
7F：推 winpower:會不會是廠商的毛細管剛換~~~之前也有這樣的狀況 03/12 13:17
8F：推 weric0207:廠商有附standard的序列嗎 03/12 13:40
9F：→ newpostt:你是指control嗎 都很漂亮 03/12 21:51
10F：推 leftt:哪一家定序公司呢? 03/16 19:30