作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
標題[求救] primer之保存
時間Thu Mar 5 21:39:39 2009
想請問 一般訂購來 用水回溶後的primer可以保存多久
之前有一批 (大概去年9月)primer 當初使用時
一作PCR就有得到所要的片段
最近 再拿這批primer 想要再作PCR
結果就出問題了
仿照以前的條件 溫度去進行PCR
得到的結果
都只是在膠的底部有模糊的條帶 應該是primer自黏吧??
可是以前pcr時都沒這種情況
所以!!!想問 一般primer保存是多久阿??
謝謝大家
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◆ From: 140.130.38.65
1F:推 kyokolove:回溶濃度大概多少呢?primer一般都可以保存超久的阿 03/05 22:14
2F:→ kyokolove:應該先檢查PCR的buffer or enzyme.. 03/05 22:14
3F:推 f9361046:妳是保存在幾度阿? 03/05 22:19
4F:→ bbiioo:回溶是依照廠商100mM,PCR的buffer or enzyme確認過沒問題 03/05 22:22
5F:→ bbiioo:是放在-20度C 03/05 22:23
6F:推 wangharry:在二次水沒問題的前提下,我放在4度冰箱兩個月都沒問題 03/06 07:18
7F:→ bbiioo:水沒問題..那幾罐到目前 應該有5個多月.. 03/06 08:50
8F:推 damyr:純水-20度沒反覆解凍,可以放一年 03/06 10:58
9F:→ damyr:你應該不是放在門上那種溫度不穩定的地方吧 03/06 10:59
10F:→ bbiioo:沒有!!我放在 冰箱架上 03/06 11:05
11F:推 arlix:若是primer自黏,可以直接進95度加熱一分鐘,然後馬上插冰 03/06 12:31
12F:→ arlix:等冷了primer應該可以回到單股形式 03/06 12:31
13F:推 qumai:可以放-80度 然後取5uL出來稀釋到10mM用 剩下的應該很安全 03/06 13:48
14F:→ qumai:如果有問題就從-80度再取 避免解凍太多次 03/06 13:49
15F:→ bbiioo:恩 了解 謝謝 03/06 17:41
16F:推 lainhat:PCR一開始不就94度了 還有必要特地去denature primer嗎? 03/10 19:44