作者abbyyam (ㄟ逼)
看板Biotech
標題[求救] 做Western 的protein問題
時間Wed Mar 4 21:21:58 2009
最近做western 簡直是撞鬼了
怎麼做怎麼出問題
不過這次主要來問一下protein 的問題
就是為什麼我的protein + dye 然後弄下去煮以後
有些sample會出現一塊一塊 (或是說一坨一坨) 的...雜質還是沉澱物
害我load膠的時候卡住
而且我也很擔心這樣我蛋白濃度會不會因此改變
導致先前算好要load的量不對
這到底是為甚麼呢? 出現這種東西有關係嗎? 要怎麼解決呢?
PS 我在抽protein的時候都有加proteinase inhibitor
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 aceliang:煮到糙揮搭了(誤) 03/04 21:30
2F：推 humwang:可以試試看在加sample buffer前用1ml針筒抽吸幾次 03/04 21:38
3F：推 ordinary07:sample的DNA? 03/04 22:58
4F：推 chiehgriffin:哪一種protein sample? 03/04 23:00
5F：推 tsubasawolfy:dye理面的SDS沉澱了0.0? 03/04 23:11
6F：推 kirby0415:是DNA吧...碰到sample buffer會有白色一坨坨的 03/04 23:58
7F：推 NKTcell:應該是sample的DNA 03/05 00:39
8F：推 tchan:一樓是白癡！不曉得哪個學校的.... 03/05 01:27
9F：推 tchan:...............................哈哈誤很大！ 03/05 01:58
10F：推 aborwang:可能是sample的genomic DNA，可以多抽吸幾次打破它，或者 03/05 05:56
11F：→ aborwang:稀釋降低Lysis Buffer中SDS濃度，處理離心後可得較澄清 03/05 05:57
12F：推 ATPase:一樓是在開玩笑啦 ^^"" 03/05 16:38
13F：→ abbyyam:原來是DNA嗎?@@" 我的sample是細胞 03/06 01:00
14F：推 leoblack:1F拿著"誤"的舉牌了~還是中槍~囧 03/06 09:23
15F：→ leoblack:不過~在笨笨的碩一時~真的有把蛋白煮到"糙揮搭"~囧 03/06 09:24
16F：推 HXZ:拿去sonicate 03/06 16:04