作者vancent (新的鄉民XD)
看板Biotech
標題Re: [求救] Western bolt有下雨痕
時間Wed Feb 18 15:27:00 2009
可能是膠片中有小氣泡，或是樣本中有不溶物質，或所用樣本溶液中的
-mercaptoethanol 品質不佳；acrylamide 溶液變質產生固体微粒後，也可能有下雨現象
。
摘自莊榮輝老師生化網站
給你參考XD
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.94.137
1F：推 cocoon121:確定GEL沒氣泡 至於變質....和背景出現雨痕沒關係吧@@ 02/18 16:22
2F：→ cocoon121:我們的那些BUFFER都是共用的 別人沒這問題ㄚ 02/18 16:22
3F：推 turtle24:你同時做兩片染不同一抗的看看 就知道一抗有沒有問題 02/18 16:39
4F：推 cocoon121:我的一抗是客製化的 所以只抓特定蛋白....無法去用不同 02/18 16:53
5F：→ cocoon121:的一抗@@! 02/18 16:53
6F：→ cocoon121:而SDS所染到的也是我要的蛋白質 HI到的也是 02/18 16:54
7F：推 tsubasawolfy:三樓的意思是同樣的sample染不同的一抗 這樣就知道 02/18 19:11
8F：→ tsubasawolfy:是不是sample內物質引起還是Ab引起 不過從你CB圖來看 02/18 19:12
9F：→ tsubasawolfy:你的sample是純化過的吧?? 這樣可能要拿total lysate 02/18 19:13
10F：→ tsubasawolfy:下去分別跑不同AB了吧 02/18 19:13
11F：推 cocoon121:恩 是有經過特別處理的...可是total 不會有這個band耶 02/18 21:30
12F：→ cocoon121:因為我是根據該蛋白的特性去純化有paper指出 02/18 21:30
13F：→ cocoon121:用一般方式萃出來的 不會有該蛋白...>< 02/18 21:30
14F：推 turtle24:我的意思是隨便用個positive去測一下是抗體或"手"有問題 02/18 23:18
15F：→ turtle24:如果不同抗體也有下雨痕就不是客製化那支抗體的問題了 02/18 23:19