作者yeni (我需要一點刺激)
看板Biotech
標題[求救] 酵素純化的問題
時間Wed Dec 10 12:56:30 2008
我用 1.6 x 100 cm 的管柱做膠過濾
膠體充填 90 cm
使用的膠體為 Sephacryl S100 HR 它分子量的範圍是 1000-100000
我的目標蛋白大約 176 ml 就可出來
看起來分子量還頗大
但我跑 SDS PAGE 看到的分子量卻只有大約 20 KDa
似乎膠過濾跟 SDS PAGE 得到的結果對不大起來
請問這是正常的嗎
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◆ From: 140.121.156.239
1F:推 CsmuKoji:monomer or polymer? 12/10 14:39
2F:→ sGoat:你應該先全收集起來跑一次看出來的在哪個體積裡才對吧 12/10 15:02
3F:→ sGoat:另外除非純度夠,不然只看SDS似乎太早下定論,不做western? 12/10 15:03
4F:→ yeni:一管收5mL的話 會在35管出來 12/10 15:16
5F:推 sGoat:如果有抗體的話不如做個western順便確認是不是,不然很難確定 12/10 16:53