作者cecik (追隨風那樣)
看板Biotech
標題[求救] Western 新手的問題
時間Thu Dec 4 18:02:33 2008
最近才開始做western,但是因為身在國外語言障礙很大
光是學完wetsern已經耗掉我和那邊唯一勉強會通英文的人的很多體力
所以有些網路上查不到的資料只能向版友請教了,希望大家見諒
1. 請問大家hybrid inetrnal control (如actin)
是會跑另一片膠?還是用原來的membrane(看target protein的)striped後再染呢?
(對不起這問題很基本但是我蒐尋一堆關鍵字都找不到...)
能簡述一下方法嗎?
2. 請問準備sample時,protein extraction要保存是有先經過什麼處理嗎?
因為很久以前曾經看過別的實驗室protein抽好後去測濃度
然後就用sample bf dilute到要做實驗的量,之後全部一起加熱95度後再放-80冰箱
現在的實驗室則是抽好後就凍起來,要做才稀釋再加熱
這兩種方式是都可以嗎,或是有優劣呢?
3. 請問整隻手伸進去定影劑會有甚麼不良影響嗎? <--這問題大家可以跳過 XD
因為今天不幸手滑讓底片沉下去只好整隻手下去撈,覺得自己真蠢...
先謝謝大家了,如果有任何western的建議也歡迎不吝指教,感激 >"<
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蘆葦作成的風笛啊
捉弄著森林中單獨行走的人呢
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 134.160.214.36
1F:推 nixo:為什麼不戴個手套再下去撈? 12/04 18:35
2F:→ cecik:有戴手套,但那個是很深的tank不是盤子,差點連肩膀都伸進去 12/04 18:44
3F:→ cecik:感謝版友來信提醒那非常髒,有很多溴化銀,我牢牢記住了 orz 12/04 18:46
4F:推 tsubasawolfy:第一個要看你的target protein 切membrane時會不會 12/04 18:59
5F:推 tsubasawolfy:會切到 第二個是看你的用途而定 12/04 19:04
6F:推 WenzdayJack:感覺你某隻手已經會發銀光了XDDD 12/05 02:50