作者daniel2806 (Tomorrow is another day)
看板Biotech
標題[求救] flow cytometer的問題
時間Tue Nov 25 23:07:48 2008
我覺得這題很難!!!
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實驗大致是
我們有一個compound要去處理jurkat cell
而我們使用JC-1這個染劑去偵測此compound是否會導致粒線體的膜電位下降.
而當JC-1染上活細胞(粒線體的膜電位正常), 會形成雙體, 成紅光.
當JC-1染上死細胞(粒線體的膜電位下降), 則是單體, 成綠光.
跑flow去偵測
但是問題就是出在
我的jurkat cell有transfect 一個帶有GFP的plasmid.
本身就會發出綠光....
在這樣的情況下, 我如何區分cell發出的綠光是本身的GFP,
還是因為粒線體的膜電位下降, JC-1發出的綠光???
如何做conpensation呢????
拜託了~~~各位高手!!!!
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◆ From: 140.109.89.228
1F：推 gg258:這compound單體跟雙體不同顏色啊？GFP讓他不表現不行嗎？ 11/25 23:58
2F：推 datro:換染劑 TMRM之類的 11/26 00:46
3F：→ hchs890843:我想到的是用Elisa跑冷光@.@ 11/26 01:32
4F：推 Nikio:ㄟ～一定要用GFP嗎？不然用那種可以測連續波長的儀器測吧 11/26 01:33
5F：推 alanjohn:用inducer去inhibit螢光表現 11/26 10:25
6F：→ daniel2806:內放GFP是為了其他的實驗, 所以無法避免..... 11/27 00:11