作者tcmakol ()
看板Biotech
標題[求救] flow cytometry的問題
時間Fri Sep 26 18:31:14 2008
之前做flow時 自己接一抗二抗
都會做一組negative conrtol(不加一抗只加二抗)跟實驗組比
都可以看到明顯的向右移有 shift的情形
然後後來買了廠商接好的一抗帶螢光
也是做一組negative conrtol(用isotype)跟實驗組比
卻發現有shift的情形 但是卻是向左移
比negative control表現量還要少
同樣的細胞以及組別跟設定
但結果卻是向左移 做了好幾次了 都是同樣的結果
想請問各位高手 這樣是哪裡出了問題呢
拜託各位高手了
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 203.64.247.100
1F：推 abbyyam:我剛剛看了DATA sheet...懷疑他接的不是FITC 09/26 20:46
2F：推 abbyyam:這是他接的螢光↓ 09/26 20:50
4F：→ abbyyam:492/517 nm似乎不是FL1~FL3可用的，建議你把賣你抗體 09/26 20:52
5F：→ abbyyam:廠商叫來問~ (其實我也不是很確定啦XD) 09/26 20:53
6F：推 abbyyam:而且你染的會往左移相當合理，492的確比FL1的525還小 09/26 20:58
7F：→ abbyyam:故你染到的細胞maybe就會往左(小)移!這也是我的猜測啦= =+ 09/26 21:00
8F：推 BLACK13:檢查過FSC/SSC嗎？ 09/26 21:32
9F：→ tcmakol:有檢查過...gate也是gate我要的細胞 09/26 21:38