作者bider (買沉木)
看板Biotech
標題[求救]IP抓不到target protien
時間Fri Jul 25 22:28:43 2008
小弟這幾天做IP
用monoclonal anti-mouse的1抗
polyclonal anti-goat的2抗
結果western出來結果很多雜band
想請問有沒有前輩有類似經驗的可以解決@@
按理來說
不同的Fc應該不會有問題才對
是因為polyclonal造成的嗎?
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 118.170.139.5
1F：→ sisyphus:你的anti-動物 應該都打反了吧? 通常會擔心是一抗的問題 07/25 23:46
2F：→ sisyphus:antubody來源?同樣實驗有別人作過? 07/25 23:47
3F：→ bider:抱歉 不是很懂打反的意思QQ 抗體都是跟廠商買的 07/26 07:08
4F：→ bider:1家是dako 1家是R&D 實驗有沒有其他人做過我可能要去查 07/26 07:09
5F：→ bider:謝謝大家的幫忙 我會再去試試看^^ 07/26 07:18
6F：推 sisyphus:買來的抗體效果好壞差很多 跟他宣稱的是不是monoclonal 07/26 08:00
7F：→ sisyphus:沒關係 有時候要重買好幾家才買得到好的antibody 07/26 08:01
8F：→ sisyphus:你有作其它WB的經驗嗎 有而且沒問題的話 可能antibody的 07/26 08:02
9F：→ sisyphus:問題 07/26 08:02
10F：→ bider:恩 我再去看有沒有paper有人引用 謝謝S大 07/26 08:03
11F：推 humwang:IP的抗體最好用polycolonal,因為可以確保你能抓到你要的 07/26 21:39
12F：→ humwang:western時再換用monoclonal 以增加specificity... 07/26 21:39
13F：推 tincta:推樓上 ︿︿ 07/26 22:29
14F：→ bider:但是因為沒辦法做crosslink 所以才用這樣 怕coIP另一個 07/26 23:35
15F：→ bider:也是anti-mouse 07/26 23:35