作者bider (买沉木)
看板Biotech
标题[求救]IP抓不到target protien
时间Fri Jul 25 22:28:43 2008
小弟这几天做IP
用monoclonal anti-mouse的1抗
polyclonal anti-goat的2抗
结果western出来结果很多杂band
想请问有没有前辈有类似经验的可以解决@@
按理来说
不同的Fc应该不会有问题才对
是因为polyclonal造成的吗?
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.170.139.5
1F：→ sisyphus:你的anti-动物 应该都打反了吧? 通常会担心是一抗的问题 07/25 23:46
2F：→ sisyphus:antubody来源?同样实验有别人作过? 07/25 23:47
3F：→ bider:抱歉 不是很懂打反的意思QQ 抗体都是跟厂商买的 07/26 07:08
4F：→ bider:1家是dako 1家是R&D 实验有没有其他人做过我可能要去查 07/26 07:09
5F：→ bider:谢谢大家的帮忙 我会再去试试看^^ 07/26 07:18
6F：推 sisyphus:买来的抗体效果好坏差很多 跟他宣称的是不是monoclonal 07/26 08:00
7F：→ sisyphus:没关系 有时候要重买好几家才买得到好的antibody 07/26 08:01
8F：→ sisyphus:你有作其它WB的经验吗 有而且没问题的话 可能antibody的 07/26 08:02
9F：→ sisyphus:问题 07/26 08:02
10F：→ bider:恩 我再去看有没有paper有人引用 谢谢S大 07/26 08:03
11F：推 humwang:IP的抗体最好用polycolonal,因为可以确保你能抓到你要的 07/26 21:39
12F：→ humwang:western时再换用monoclonal 以增加specificity... 07/26 21:39
13F：推 tincta:推楼上 ︿︿ 07/26 22:29
14F：→ bider:但是因为没办法做crosslink 所以才用这样 怕coIP另一个 07/26 23:35
15F：→ bider:也是anti-mouse 07/26 23:35