作者a64toto (上了!上了!哇哈哈)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問PCR的問題
時間Sat Jun 21 18:35:07 2008
那再請問各位一下
就是P出來的結果
發現有出來兩三條Band
然後預估的size雖然也有band
但是看起來淡淡的不太亮
後來才發現是primer兩個base錯誤
請問需要重新訂購primer嗎
還是因為target是病毒的DNA,產生了突變的情形呢?
※ 引述《a64toto (上了!上了!哇哈哈)》之銘言：
: 請問一下
: 如果在設計PCR primer的序列
: 總長26 mer的primer
: 如果錯了兩個base,還能P的出來嗎
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.124.161.222
1F：推 MrCAKE:這表示primer做錯或是品質不好 請他們重做 06/21 20:15
2F：→ MrCAKE:一定要要求他們免費重新合成一次 不要傻傻的再付一次錢 06/21 20:16
3F：→ MrCAKE:這種情況跟template沒有關係 100%是primer序列錯 06/21 20:17
4F：推 sisyphus:好像是設計錯的不是? 06/21 23:01
5F：推 MrCAKE:喔喔 可能是我會錯意了 能定序的話先定定看吧 06/22 17:14
6F：推 sGoat:看你PCR的目的是要做啥?不轉殖,不表現,不在轉譯區域內OK的 06/23 11:02
7F：→ sGoat:產量變少可能是錯誤影響primer annealing或是你PCR條件不好 06/23 11:04