作者dakota (Koyaaniqatsi)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問有關於FRET
時間Sat Jun 14 10:16:48 2008
※ 引述《lstlst (lstlst)》之銘言：
: 請問有人有做過顯微鏡Fluorescence / Forster resonance energy transfer(FRET)實
: 驗嗎?
: 我本身有兩個PROTEIN,
: 各接在不同的螢光蛋白上,
: 一個會發綠光,
: 一個會發紅光,
: 請問這個實驗是只有軟體部分比較難還是連顯微鏡都很特殊,都很難用??
: 他跟我拿了original images (當初做cotransfection在螢光顯微鏡下的照片),
: 說要做signal 比較之類的,
: 後來也沒下文....
: 另外一問,FRET可以用FIXED 玻片看嗎??
可以用Fixed玻片看. 以我們學校儀器中心的經驗, 會有操作人員幫你作
(我們是olympus的confocal microscope). 你要有分別單送一個螢光蛋白的細胞樣
本讓機器分析單一螢光背景值,然後拿同時送進兩個螢光蛋白的來作FRET實驗,
也就是要準備三種細胞染色樣本. 我記得結果並不難看懂, 但是軟體我就不知道難
不難了, 因為是操作人員弄的.
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 118.169.163.131
1F：推 lstlst:謝謝,我會準備一組FIXED SLIDES給那個荷蘭老師..再次感謝 06/15 04:29
2F：→ lstlst:我的玻片好像也是要用OLYMPUS的CONFOCAL 看.... 06/15 04:30
3F：推 fjubiology:應該說是用CONFOCAL MS看唄 06/15 09:15
4F：推 lstlst:推樓上,其實我本人沒用過CONFOCAL的顯微鏡,只知道品牌不同 06/16 09:00
5F：→ lstlst:我只是MASTER學生,PROJECT一開始是學用螢光顯微鏡.. 06/16 09:01
6F：→ lstlst:可是越來越想玩多種的顯微鏡了@@每個廠牌的軟體都不一樣 06/16 09:01
7F：→ lstlst:感覺很有挑戰性咧@@ 06/16 09:02
8F：→ lstlst:可惜老師不給玩...(哭哭) 06/16 09:02
9F：→ dakota:哈1st1st,我也跟你一樣過啊 但是你知道這些貴重儀器多少錢 06/16 15:38
10F：→ dakota:就算學校有影樣中心也半小時500元,更別提外校 06/16 15:40
11F：→ dakota:所以我建議你把三種samle都準備好好的 然後找個友善大學的 06/16 15:42
12F：→ dakota:儀器中心 06/16 15:43