作者owl628 (owl628)
看板Biotech
標題[求救] 定序問題
時間Fri Jun 13 13:30:37 2008
我把某個TA cloning產物拿去定序
同樣的insert挑了不同的三個colony去定序
結果都收到mutiple templates的回覆
可是我很確定挑的時候沒問題
我的vector是topo 2.1
定序的primer是M13 F& R
我在想會不會是我的insert理頭剛好有那對primer會辨識的序列
所以導致mutiple templates的結果
謝謝~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.139.218
1F：推 leftt:有這個疑慮的話 換用你PCR的primer去當定序primer試看看 06/13 13:40
2F：→ owl628:因為我夾insert的那對primer要一萬多塊,量又很少,所以..... 06/13 13:43
3F：推 yaliu:那換T7定定看? 06/13 15:17
4F：→ owl628:目前正在用T7試試看,結果還不知道,謝謝~ 06/13 15:27
5F：推 leftt:你的primer為什麼那麼貴? 如果是很長的 另外合成其中一小 06/13 17:32
6F：→ leftt:段(20b) 然後當定序primer看看 多花個幾百元而已 06/13 17:33
7F：→ sinDog:你的PRIMER 應該是有LABEL的吧 重定一個沒有LABEL的就好ㄌ 06/15 21:54
8F：→ sinDog:最衷心建議 換家再定一次 最近 很多公司都很瞎 錢太好賺ㄌ 06/15 21:55