作者beautyfish (天使光)
看板Biotech
標題Re: [求救] DNA總是切不好
時間Mon May 5 15:44:09 2008
不好意思自己回自己的文XD
我後來DNA已經有切好了
我的切法是取20ug的DNA 把體積切到50ul
此時酵素用的量為1.5ul
切了3~4小時後 又補了一次1.5ul的酵素
這邊是用1.5ul的酵素加buffer之後補水讓總體積成為50ul
再加進去到原先切的那50ul的reaction中 total 100ul 切O/N
這樣跑出來的DNA很漂亮
老闆說是有切開了這樣
提供大家參考一下
之前有板友提到說我使用的EcoR1與BamH1不需要切那麼久
但是在我的情況中 我切了三小時後有先取一點去跑電泳
由於大多數的DNA還是累積在上面沒有跑下來
所以我還是又多補了酵素去切
謝謝^^
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1F：推 dankai:請問你的酵素是用多少unit?? ^^ 05/05 16:45
2F：推 xenopus:EcoRI切太久不會有問題嗎? 05/06 13:05